HS3ST3B1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424928
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HS3ST3B1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HS3ST3B1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HS3ST3B1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424928 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hs3st3b1 codifica a heparan sulfato–glicosamina 3-O-sulfotransferase 3B1 (HS3ST3B1), uma enzima localizada no complexo de Golgi que adiciona grupos 3-O-sulfato às cadeias de heparan sulfato. Essa modificação ajusta a ligação dos proteoglicanos de heparan sulfato a fatores de crescimento, quimiocinas e componentes da matriz extracelular, moldando processos de sinalização e adesão, como a modulação das vias de FGF e VEGF e a comunicação célula–célula. Alterações nos padrões de sulfatação do heparan sulfato têm sido associadas a gradientes de morfógenos desregulados, sinalização inflamatória e interações tumor–estroma, tornando o HS3ST3B1 relevante para estudos de regulação do microambiente e de especificidade receptor–ligante. Em sistemas murinos, a perturbação de Hs3st3b1 permite investigar mecanisticamente as relações estrutura–função dos glicosaminoglicanos no desenvolvimento e na homeostase tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HS3ST3B1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hs3st3b1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hs3st3b1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hs3st3b1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HS3ST3B1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hs3st3b1 para a investigação da sinalização de HS3ST3B1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hs3st3b1 críticos para a função HS3ST3B1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hs3st3b1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HS3ST3B1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HS3ST3B1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hs3st3b1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HS3ST3B1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HS3ST3B1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hs3st3b1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hs3st3b1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.