Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO HRF (m): sc-423518
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HRF Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HRF, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HRF Antibody (B-3): sc-133131
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HRF (m) | sc-423518 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin *Tpt1* code le facteur libérateur d’histamine (HRF), également appelé « translationally controlled tumor protein » (TCTP), une protéine cytosolique conservée impliquée dans la régulation de la croissance cellulaire, des réponses au stress et des voies de signalisation de survie. HRF participe à des voies liées à l’homéostasie du calcium, au contrôle de l’apoptose et à la modulation des fonctions inflammatoires et des cellules immunitaires, avec des rôles rapportés dans la libération de cytokines et les programmes d’activation cellulaire. Une activité HRF/TPT1 altérée a été associée à une inflammation et une signalisation immunitaire dérégulées, ainsi qu’à des phénotypes prolifératifs anormaux pertinents en oncologie et dans le remodelage tissulaire. Ces caractéristiques font de *Tpt1* une cible utile pour disséquer les mécanismes d’adaptation au stress, la régulation immunitaire et les décisions de destinée cellulaire dans des systèmes modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HRF (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tpt1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tpt1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tpt1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HRF.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tpt1 pour l'étude de la signalisation de HRF, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tpt1 essentiels à la fonction de HRF
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tpt1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HRF plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le HRF plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tpt1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HRF plasmide HDR (m) et le HRF (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tpt1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tpt1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.