Plasmide Double Nickase (h) HoxC9: sc-404568-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxC9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxC9 Double Nickase (h) et le plasmide HoxC9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXC9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HoxC9 Antibody (HOXCA6E6): sc-81100
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxC9 | sc-404568-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxC9 | sc-404568-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXC9 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxC9, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à la séquence, qui organise l’axe antéro-postérieur au cours de l’embryogenèse et oriente les programmes de différenciation neurale et mésodermique. Dans les cellules humaines, HoxC9 influence l’état de la chromatine et les réseaux transcriptionnels qui contrôlent la spécification des lignages, la maturation neuronale et l’identité régionale, via les circuits régulateurs du cluster HOX et des complexes transcriptionnels dépendants de cofacteurs. Une expression dérégulée de HOXC9 a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux, où des programmes géniques pilotés par les HOX altérés peuvent affecter la prolifération, la migration et les états de différenciation. En tant que régulateur du développement associé, selon le contexte, à des rôles oncogènes ou suppresseurs de tumeur, HOXC9 est fréquemment étudié pour son implication dans les transitions de destinée cellulaire et le remodelage transcriptionnel lié aux maladies.
HoxC9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXC9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXC9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXC9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXC9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.