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HoxA4双切口酶质粒(h) | sc-405914-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxA4双切口酶质粒(h2) | sc-405914-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA4 编码同源盒转录因子 HoxA4,这是一种 DNA 结合型调控蛋白,有助于建立胚胎发育过程中的前后轴(anterior–posterior)模式,并维持细胞的位置信息与身份。在人类细胞中,HoxA4 调控与分化、增殖及谱系承诺相关的转录程序,并与发育信号通路及染色质调控网络相整合。HOXA4 的活性与 HOX 基因簇的调控密切相关,包括由 Polycomb/Trithorax 复合体介导的表观遗传控制,并在造血与间充质等组织背景下促进组织特异性的基因表达。HOXA4 表达失调与发育相关基因特征的改变有关,并被用于研究其与致癌性转录状态及异常分化之间的关系。
HoxA4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HOXA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HOXA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HOXA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HOXA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。