HLA-E Lentiviral Activation Particles (h): sc-403124-LAC

HLA-E kodiert ein nicht-klassisches MHC-Klasse-I-Molekül, das ein eingeschränktes Peptidrepertoire präsentiert, einschließlich Leader-Sequenz-Peptiden anderer HLA-Klasse-I-Proteine, um die Immunüberwachung zu regulieren. Durch die Bindung an inhibitorische und aktivierende Rezeptoren wie NKG2A/CD94 und NKG2C/CD94 auf natürlichen Killerzellen und bestimmten T‑Zell-Subpopulationen moduliert HLA-E an der Zelloberfläche Zytotoxizität, Zytokinproduktion und Toleranz. Seine Expression und Peptidbeladung sind mit Antigenverarbeitungs- und -präsentationswegen verknüpft, an denen TAP und der Peptidbeladungskomplex im endoplasmatischen Retikulum beteiligt sind. Eine fehlregulierte HLA-E-Menge oder Peptidpräsentation wird in Zusammenhängen wie Infektion, Entzündung, tumorbedingter Immunflucht und Transplantationsimmunbiologie untersucht, in denen die Checkpoint-Signalgebung von NK-Zellen den Immunverlauf prägt.

HLA-E Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente HLA-E-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HLA-E Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der HLA-E-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HLA-E-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen HLA-E-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.