HE4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402876-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HE4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HE4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HE4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WFDC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HE4 Anticorpo (3F9): sc-293473
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HE4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HE4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WFDC2 codifica a HE4 humana, uma glicoproteína secretada contendo domínio de proteína de soro ácido (WAP), implicada na homeostase e no remodelamento epitelial. A HE4 tem sido associada à regulação da atividade de proteases extracelulares e às interações com a matriz, sustentando processos como adesão celular, migração e organização tecidual. Alterações na expressão de WFDC2/HE4 são frequentemente estudadas no contexto de programas de sinalização associados a tumores, incluindo vias que influenciam a plasticidade epitélio–mesenquimal e respostas do microambiente inflamatório. Como um fator secretado mensurável, a HE4 também é utilizada como leitura molecular para investigar a regulação transcricional, a dinâmica de secreção e perturbações de vias extracelulares em modelos de células humanas.
HE4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WFDC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WFDC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WFDC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WFDC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.