Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO HB9 (m): sc-420869
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HB9 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HB9, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HB9 Antibody (F-5): sc-515769
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HB9 (m) | sc-420869 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Mnx1 (HB9) code un facteur de transcription à homéoboîte essentiel au développement ventral de la moelle épinière ainsi qu’à la spécification et à la maturation des motoneurones somatiques. HB9 participe à des programmes transcriptionnels qui coordonnent l’identité des sous-types neuronaux, le guidage axonal et la connectivité neuromusculaire, en régulant l’expression de gènes spécifiques de lignée. Dans le pancréas, Mnx1 contribue également aux décisions de lignée endocrine, ce qui le relie à des voies développementales qui façonnent l’organogenèse et la détermination du destin cellulaire. Une expression ou une fonction altérée de MNX1 a été associée à des phénotypes de développement des motoneurones et a été étudiée dans le contexte de troubles congénitaux du développement neurologique et pancréatique, ainsi que de dérégulations de lignée en biologie du cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HB9 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Mnx1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Mnx1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Mnx1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HB9.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Mnx1 pour l'étude de la signalisation de HB9, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Mnx1 essentiels à la fonction de HB9
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Mnx1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HB9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le HB9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Mnx1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HB9 plasmide HDR (m) et le HB9 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Mnx1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Mnx1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.