Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) GSTA1: sc-403681-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GSTA1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GSTA1 (h) y el plásmido de doble nickasa GSTA1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GSTA1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GSTA1 Anticuerpo (R-14): sc-100546
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GSTA1 | sc-403681-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GSTA1 | sc-403681-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutatión S-transferasa alfa 1 (GSTA1) es una enzima citosólica de detoxificación de fase II que cataliza la conjugación de glutatión a xenobióticos electrófilos y a productos endógenos de la peroxidación lipídica, facilitando su inactivación y eliminación. Contribuye a la homeostasis redox y a la protección frente al estrés oxidativo al limitar la acumulación de aldehídos reactivos y modular las respuestas celulares al daño inducido por electrófilos. La actividad de GSTA1 se integra con el metabolismo del glutatión y con programas antioxidantes más amplios, incluidas vías coordinadas por la señalización NRF2/KEAP1. Las alteraciones en la expresión o la función de GSTA1 se han asociado con la variabilidad interindividual en el metabolismo de fármacos y con la susceptibilidad a lesión hepática inducida por tóxicos, lo que respalda su relevancia en farmacogenómica y en modelos de estrés hepatocelular.
GSTA1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GSTA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GSTA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GSTA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GSTA1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.