Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO group VI iPLA2 (m): sc-424697
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- group VI iPLA2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique group VI iPLA2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: group VI iPLA2 Antibody (D-4): sc-376563
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO group VI iPLA2 (m) | sc-424697 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Pla2g6 code la iPLA2 de groupe VI, une phospholipase A2 indépendante du Ca2+ qui hydrolyse les phospholipides membranaires afin de libérer des lysophospholipides et des acides gras libres, dont l’acide arachidonique. Par le remodelage lipidique et la signalisation, elle influence l’homéostasie membranaire, l’intégrité mitochondriale, le trafic vésiculaire, ainsi que les voies en aval des eicosanoïdes et du stress oxydant. Dans les systèmes murins, l’activité de Pla2g6 a été associée à des phénotypes neurodégénératifs, à la production de médiateurs lipidiques liés à l’inflammation et à une susceptibilité aux dommages membranaires dans des tissus métaboliquement actifs. Ces fonctions font de Pla2g6 un nœud utile pour étudier la régulation, pilotée par les lipides, des réponses cellulaires au stress et des processus pertinents pour la neuroinflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO group VI iPLA2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pla2g6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pla2g6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pla2g6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine group VI iPLA2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pla2g6 pour l'étude de la signalisation de group VI iPLA2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pla2g6 essentiels à la fonction de group VI iPLA2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pla2g6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le group VI iPLA2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le group VI iPLA2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pla2g6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le group VI iPLA2 plasmide HDR (m) et le group VI iPLA2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pla2g6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pla2g6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.