Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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group VI iPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424697
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- group VI iPLA2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico group VI iPLA2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:group VI iPLA2 Anticorpo (D-4): sc-376563
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
group VI iPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424697 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pla2g6 codifica a iPLA2 do grupo VI, uma fosfolipase A2 independente de Ca2+ que hidrolisa fosfolipídios de membrana para liberar lisofosfolipídios e ácidos graxos livres, incluindo o ácido araquidônico. Por meio do remodelamento e da sinalização lipídica, influencia a homeostase da membrana, a integridade mitocondrial, o tráfego vesicular e vias downstream de eicosanoides e estresse oxidativo. Em sistemas murinos, a atividade de Pla2g6 tem sido associada a fenótipos neurodegenerativos, à produção de mediadores lipídicos ligados à inflamação e à suscetibilidade a danos de membrana em tecidos metabolicamente ativos. Essas funções tornam Pla2g6 um nó útil para estudar a regulação, mediada por lipídios, das respostas celulares ao estresse e de processos relevantes para a neuroinflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO group VI iPLA2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pla2g6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pla2g6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pla2g6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína group VI iPLA2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pla2g6 para a investigação da sinalização de group VI iPLA2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pla2g6 críticos para a função group VI iPLA2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pla2g6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo group VI iPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo group VI iPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pla2g6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo group VI iPLA2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR group VI iPLA2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pla2g6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pla2g6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.