GPR119 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433515
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR119 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPR119, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR119 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433515 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Gpr119 codifica o GPR119, um GPCR de classe A enriquecido em células das ilhotas pancreáticas e em populações enteroendócrinas intestinais, onde se acopla principalmente à sinalização via Gs para aumentar o cAMP intracelular. Essa via sustenta respostas de detecção de nutrientes que influenciam a liberação de incretinas, a dinâmica da secreção de insulina e a regulação mais ampla da homeostase de glicose e lipídios. Em tecidos imunes e metabólicos, a sinalização dependente de GPR119 tem sido associada à modulação do balanço energético celular e ao crosstalk hormonal entre intestino e pâncreas. Assim, a desregulação de redes associadas ao GPR119 é estudada no contexto de fenótipos metabólicos, incluindo vias relevantes para obesidade e diabetes, bem como para a função de células endócrinas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR119 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gpr119 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gpr119, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gpr119 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR119.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gpr119 para a investigação da sinalização de GPR119, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gpr119 críticos para a função GPR119
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gpr119 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPR119 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GPR119 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gpr119. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR119 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GPR119 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gpr119 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gpr119 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.