Date published: 2026-7-16

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GM-CSF Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419840-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • GM-CSFO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase GM-CSF (m) e o Plasmídeo Double Nickase GM-CSF (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Csf2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GM-CSF Anticorpo (B6-2-hGMCSF): sc-32753
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    GM-CSF Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-419840-NIC
    20 µg
    $410.00

    GM-CSF Plasmídeo duplo de Nickase (m2)

    sc-419840-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene **Csf2** de camundongo codifica o fator estimulador de colônias de granulócitos e macrófagos (GM-CSF), uma citocina que regula o desenvolvimento da linhagem mieloide e a ativação funcional de monócitos, macrófagos e células dendríticas. A sinalização de GM-CSF aciona complexos do receptor de GM-CSF para ativar as vias JAK2/STAT5, MAPK/ERK e PI3K/AKT, coordenando a sobrevivência, a proliferação e a diferenciação celulares, bem como a produção de mediadores inflamatórios. **In vivo**, alterações na atividade de GM-CSF influenciam a hematopoese, a apresentação de antígenos e o tônus inflamatório dos tecidos, tornando **Csf2** um nó-chave em modelos de autoimunidade, neuroinflamação, inflamação alérgica das vias aéreas e patologia conduzida por células mieloides. Essas propriedades sustentam estudos mecanísticos de redes de citocinas e da comunicação entre a imunidade inata e adaptativa em sistemas murinos.

    GM-CSF O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Csf2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Csf2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Csf2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Csf2 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.