Plasmide Double Nickase (h) Glutathione Peroxidase 7/GPX7: sc-404694-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Glutathione Peroxidase 7/GPX7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase (h) et le plasmide Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GPX7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Glutathione Peroxidase 7/GPX7 | sc-404694-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Glutathione Peroxidase 7/GPX7 | sc-404694-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPX7 code la glutathion peroxydase 7, une peroxydase à thiol localisée dans le réticulum endoplasmique qui limite l’accumulation de peroxyde d’hydrogène et d’hydroperoxydes lipidiques et contribue au maintien de l’homéostasie du repliement des protéines. En soutenant le tamponnement rédox et le contrôle qualité des protéines du RE, GPX7 s’inscrit à l’interface des réponses au stress oxydant et de la signalisation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR), influençant la sécrétion, la protéostase et la survie cellulaire en conditions de stress. Une activité altérée de GPX7 a été associée à une dérégulation de la signalisation rédox, à une sensibilité accrue au stress du RE et à des modifications des programmes de prolifération et d’apoptose observées dans divers contextes pertinents pour les maladies, notamment les lésions tissulaires associées à l’inflammation et la biologie tumorale. Par conséquent, GPX7 est fréquemment étudiée dans des modèles de lésion oxydative, de déséquilibre de la protéostase et de réseaux de signalisation dépendants du rédox.
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GPX7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GPX7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GPX7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GPX7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.