Plasmide Double Nickase (h) GI24: sc-407831-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GI24 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GI24 Double Nickase (h) et le plasmide GI24 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant VSIR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GI24 | sc-407831-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GI24 | sc-407831-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VSIR (V-set immunoregulatory receptor), également connu sous le nom de GI24/VISTA, code une molécule de point de contrôle immunitaire de la famille B7 qui module l’activation des lymphocytes T et contribue au maintien de la tolérance périphérique. GI24 est exprimé principalement dans les compartiments hématopoïétique et myéloïde, où il influence la fonction des cellules présentatrices d’antigènes et atténue les programmes de cytokines inflammatoires. Par la régulation de la signalisation co‑stimulatrice, VSIR contribue à l’homéostasie immunitaire au niveau des tissus et au sein du microenvironnement tumoral. Une expression ou une signalisation dérégulée de VSIR a été associée à une altération de l’immunité antitumorale et à des états inflammatoires chroniques, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de l’immunorégulation.
GI24 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus VSIR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de VSIR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de VSIR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de VSIR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.