Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GDF-8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400693-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GDF-8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GDF-8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GDF-8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MSTN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GDF-8 Anticorpo (1L4): sc-134345
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GDF-8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400693-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GDF-8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400693-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O MSTN codifica o fator de diferenciação do crescimento 8 (GDF-8, miostatina), um ligante secretado da superfamília TGF-β que restringe o crescimento do músculo esquelético ao limitar a proliferação e a diferenciação de mioblastos. O GDF-8 sinaliza principalmente por meio de receptores de activina do tipo II para ativar programas transcricionais dependentes de SMAD2/3 e interagir com as vias PI3K–AKT–mTOR e ubiquitina–proteassoma, que regulam a síntese e a degradação de proteínas. Alterações na atividade de MSTN/GDF-8 têm sido associadas a fenótipos de hipertrofia ou perda muscular e são frequentemente estudadas no contexto de sarcopenia, caquexia, modelos de distrofia muscular e regulação metabólica. In vitro, a perturbação de MSTN ajuda a elucidar mecanismos de miogênese, sinalização extracelular e remodelação do tipo de fibra em células humanas.
GDF-8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MSTN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MSTN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MSTN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MSTN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.