GART Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403800-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GARTO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GART (h) e o Plasmídeo Double Nickase GART (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GART. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GART Anticorpo (D-4): sc-166379
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GART Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403800-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GART Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403800-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GART humano codifica uma enzima trifuncional que catalisa etapas-chave na via de biossíntese de purinas de novo, sustentando a produção de monofosfato de inosina e, a jusante, de nucleótidos de adenina e guanina. Ao controlar a disponibilidade de nucleótidos, o GART influencia a síntese de DNA e RNA, a sinalização dependente de ATP/GTP e o metabolismo de um carbono por meio de reações associadas ao folato. A atividade do GART está estreitamente acoplada às exigências proliferativas e a programas metabólicos mais amplos que coordenam o fluxo biossintético com a progressão do ciclo celular. Alterações no metabolismo de purinas e na dosagem génica no locus do GART têm sido associadas a desregulação metabólica e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando o GART um alvo relevante para estudos mecanísticos da homeostase de nucleótidos.
GART O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GART em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GART. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GART. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GART interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.