Plasmide Double Nickase (h) GalNAc-T9: sc-412077-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GalNAc-T9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GalNAc-T9 Double Nickase (h) et le plasmide GalNAc-T9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GALNT9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GalNAc-T9 | sc-412077-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GALNT9** code la polypeptide N‑acétylgalactosaminyltransférase 9 (GalNAc‑T9), une enzyme initiatrice de l’O‑glycosylation de type mucine résidant dans l’appareil de Golgi, qui transfère le GalNAc sur des résidus Ser/Thr de protéines sécrétées et membranaires. En façonnant les profils d’initiation des O‑glycanes, GalNAc‑T9 influence la maturation des protéines, leur trafic et la présentation des glycannes à la surface cellulaire, avec des répercussions sur la signalisation des récepteurs et les interactions cellule–cellule ou cellule–matrice. Une expression ou une activité altérée de **GALNT9** a été associée au remodelage de la glycosylation observé lors de la transformation oncogénique et de la progression tumorale, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie épithéliale, de l’adhésion et des phénotypes métastatiques. Ce gène présente également un intérêt pour analyser comment la glycosylation régule la reconnaissance immunitaire et les signaux issus du microenvironnement extracellulaire.
GalNAc-T9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GALNT9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GALNT9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GALNT9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GALNT9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.