Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GALK1 Antibody (F-3): sc-398476. Western blot analysis of GALK1 expression in c4 (A) and A-10 (B) whole cell lysates and human colon (C) and rat liver (D) tissue extracts.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GALK1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-405217
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GALK1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在GALK1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GALK1: sc-393404，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GALK1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-405217 | 20 µg | $397.00 |
概述
GALK1 编码半乳糖激酶 1（galactokinase 1），这是一种细胞质酶，催化 α-D-半乳糖磷酸化生成半乳糖-1-磷酸，从而启动半乳糖利用的 Leloir（勒洛尔）途径通量。通过控制半乳糖进入糖酵解以及糖缀合物生物合成等路线，GALK1 的活性参与细胞能量代谢与糖链稳态的维持。半乳糖处理过程的紊乱与先天性代谢缺陷相关，而 Leloir 途径功能的改变也可在多种细胞环境中影响氧化应激反应与代谢物毒性。因此，GALK1 适用于研究碳水化合物代谢、代谢重编程，以及其对蛋白质和脂质糖基化的下游影响。
GALK1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中GALK1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对GALK1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏GALK1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使GALK1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建GALK1缺失的细胞模型，用于GALK1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 GALK1 功能至关重要的 GALK1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 GALK1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 GALK1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 GALK1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 GALK1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 GALK1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 GALK1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由GALK1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定GALK1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。