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galectin-2CRISPR激活质粒(h) | sc-405948-ACT | 20 µg | $397.00 |
人类 LGALS2 基因编码半乳糖凝集素-2(galectin-2),这是一种能结合 β-半乳糖苷的凝集素,可通过识别膜蛋白和细胞外蛋白上的特定糖链基序来调控细胞—细胞及细胞—基质相互作用。半乳糖凝集素-2 被认为参与调节免疫细胞活性与炎症信号传导,影响白细胞黏附、上皮屏障反应以及细胞因子驱动的网络等过程。通过凝集素—糖链结合,它还能影响与凋亡、先天免疫激活和组织稳态相关的通路。LGALS2 表达异常与炎症相关表型及心血管表型有关,支持其作为疾病生物学研究中机制性靶点的相关性。
galectin-2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性LGALS2的表达。
galectin-2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的LGALS2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于LGALS2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性galectin-2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的LGALS2位点,并能够研究内源性位点上依赖于galectin-2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在LGALS2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟galectin-2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。