Plasmide Double Nickase (h) FucT-l: sc-410787-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FucT-l correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FucT-l Double Nickase (h) et le plasmide FucT-l Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FUT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FucT-l Antibody (97-I): sc-52398
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FucT-l | sc-410787-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FucT-l | sc-410787-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT1 code l’α1,2‑fucosyltransférase 1 (FucT‑I), une enzyme résidente de l’appareil de Golgi qui transfère du fucose sur le galactose terminal afin de générer des structures de type H 1/2, précurseurs clés des antigènes des groupes sanguins ABO et d’épitope glycanes plus larges. En modulant la fucosylation à la surface cellulaire et des molécules sécrétées, FucT‑I influence la maturation des glycoprotéines et des glycolipides, la reconnaissance médiée par les lectines et des processus liés à l’adhésion, au carrefour de la biologie des muqueuses et des interactions immunitaires. Une activité ou une expression altérée de FUT1 peut remodeler les profils de glycosylation, fréquemment étudiés dans des contextes tels que la liaison hôte–microbe, l’inflammation et les changements de glycoformes associés aux tumeurs. Par conséquent, FUT1 est couramment étudié dans des approches de glycobiologie reliant la glycosylation golgienne à la signalisation membranaire et à la communication cellule–cellule.
FucT-l Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FUT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FUT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FUT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FUT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.