Plasmide Double Nickase (h) FucT-III/V/VI: sc-401521-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FucT-III/V/VI correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FucT-III/V/VI Double Nickase (h) et le plasmide FucT-III/V/VI Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FUT3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FucT-III/V/VI | sc-401521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FucT-III/V/VI | sc-401521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT3 code une α1,3/4‑fucosyltransférase (FucT‑III/V/VI) qui catalyse la fucosylation terminale des glycanes afin de générer des antigènes Lewis, notamment des structures sialyl‑Lewis sur les glycoprotéines et les glycolipides. Ces épitopes fucosylés régulent la reconnaissance cellule–cellule, l’adhésion des leucocytes à l’endothélium et le trafic médié par les sélectines, reliant l’activité de FUT3 aux voies de biosynthèse des glycanes au sein de l’appareil de Golgi. Les variations de la glycosylation dépendante de FUT3 contribuent aux différences interindividuelles d’expression des antigènes Lewis des groupes sanguins et peuvent moduler les interactions hôte–microbe au niveau des muqueuses ainsi que la signalisation inflammatoire. Des profils de fucosylation dérégulés sont fréquemment étudiés dans le contexte de phénotypes d’adhésion, d’invasion et d’échappement immunitaire altérés observés dans divers modèles de maladie.
FucT-III/V/VI Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FUT3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FUT3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FUT3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FUT3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.