Plasmide Double Nickase (h) FTSJD2: sc-409236-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FTSJD2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FTSJD2 Double Nickase (h) et le plasmide FTSJD2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CMTR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FTSJD2 | sc-409236-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FTSJD2 | sc-409236-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CMTR1 (également appelé FTSJD2) code une méthyltransférase spécifique de la coiffe, 2′-O-méthyltransférase du ribose, qui catalyse la formation de la structure de coiffe mRNA cap1 sur les transcrits de l’ARN polymérase II. Cette modification favorise un traitement efficace du pré‑ARNm, la traduction et la stabilité des transcrits, et contribue à la discrimination immunitaire innée entre ARN du soi et du non‑soi via des voies de détection de l’ARN liées à l’interféron. L’activité de CMTR1 s’inscrit dans des programmes plus larges du métabolisme de l’ARN qui influencent l’homéostasie de l’expression génique dans les cellules humaines. Le dérèglement de la machinerie de méthylation de la coiffe, y compris des étapes dépendantes de CMTR1, est étudié dans le contexte d’une signalisation de l’interféron altérée, des réponses antivirales et de la reprogrammation transcriptionnelle associée au cancer.
FTSJD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CMTR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CMTR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CMTR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CMTR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.