frizzled-10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406690-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- frizzled-10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase frizzled-10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase frizzled-10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FZD10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
frizzled-10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406690-NIC | 20 µg | $410.00 |
FZD10 codifica o frizzled-10, um receptor de Wnt com sete domínios transmembrana que se liga a ligantes Wnt para regular a transcrição dependente de β-catenina, bem como a sinalização Wnt não canônica associada à polaridade celular planar e a vias ligadas a Ca2+. Por meio dessas vias, o frizzled-10 influencia programas de especificação do destino celular, proliferação, polaridade e migração, que são centrais para o desenvolvimento embrionário e a homeostase tecidual. A desregulação da sinalização FZD10/Wnt tem sido associada a estados de diferenciação alterados e a redes de sinalização oncogênica em múltiplos contextos tumorais, sendo também relevante para estudos de fenótipos do tipo “stem” e de dinâmicas epitélio–mesenquimais. Como receptor de superfície, o frizzled-10 oferece um ponto acessível para dissecar o “cross-talk” entre Wnt, sinalização por fatores de crescimento e remodelamento do citoesqueleto.
frizzled-10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FZD10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FZD10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FZD10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FZD10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.