Plasmide Double Nickase (h) FRAS1: sc-407225-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FRAS1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FRAS1 Double Nickase (h) et le plasmide FRAS1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FRAS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FRAS1 | sc-407225-NIC | 20 µg | $410.00 |
FRAS1 code une protéine associée à la matrice extracellulaire, localisée dans les zones de membrane basale, et soutient l’adhérence épithélio-mésenchymateuse durant la morphogenèse embryonnaire. Elle contribue à l’ancrage et à la stabilisation des structures épithéliales, influençant des processus tels que l’intégrité cutanée, le développement cranio-facial et la morphogenèse rénale via des interactions cellule–matrice. L’altération de FRAS1 est associée à des phénotypes du spectre du syndrome de Fraser et à des anomalies congénitales, soulignant son importance dans les voies du développement qui gouvernent l’organisation tissulaire. En tant que grande protéine matricielle, FRAS1 est fréquemment étudiée dans le contexte de l’assemblage de la membrane basale, de la formation de la barrière épithéliale et des mécanismes à l’origine des malformations du développement.
FRAS1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FRAS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FRAS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FRAS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FRAS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.