Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO FOP (h): sc-407061
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FOP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FOP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FOP Antibody (B-1): sc-374340
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FOP (h) | sc-407061 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
FGFR1OP code pour FOP, une protéine associée au centrosome et aux microtubules, impliquée dans l’organisation du matériel péricentriolaire et le maintien de l’ancrage des microtubules durant la mitose. Par ses interactions avec des structures d’échafaudage centrosomales et le réseau cytosquelettique, FOP contribue à des processus tels que la progression du cycle cellulaire, la dynamique du fuseau mitotique et le transport intracellulaire. FGFR1OP a été étudié dans le contexte de réarrangements chromosomiques impliquant FGFR1, l’associant à une signalisation aberrante et à des modifications du comportement des cellules hématopoïétiques. La dérégulation de la fonction du centrosome et de l’organisation des microtubules liée à la biologie de FOP est également pertinente pour des phénotypes d’instabilité génomique utilisés dans des modèles de recherche sur le cancer et la division cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FOP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FGFR1OP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FGFR1OP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FGFR1OP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FOP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FGFR1OP pour l'étude de la signalisation de FOP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FGFR1OP essentiels à la fonction de FOP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FGFR1OP pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FOP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FOP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FGFR1OP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FOP plasmide HDR (h) et le FOP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FGFR1OP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FGFR1OP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.