Plasmide Double Nickase (h) FMO1: sc-404620-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FMO1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FMO1 Double Nickase (h) et le plasmide FMO1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FMO1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FMO1 Antibody (H-10): sc-376924
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FMO1 | sc-404620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FMO1 | sc-404620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La monooxygénase 1 contenant une flavine (FMO1) est une monooxygénase microsomale dépendante du NADPH qui catalyse l’oxygénation d’une grande diversité de substrats nucléophiles, notamment des xénobiotiques et des amines endogènes, dans le cadre de l’élimination métabolique de phase I. Dans les tissus humains, FMO1 contribue aux processus d’oxydo‑réduction et de détoxification au sein du réticulum endoplasmique et s’inscrit fonctionnellement dans des réseaux plus larges de métabolisme des médicaments, aux côtés des enzymes du cytochrome P450. Les variations d’expression ou d’activité de FMO1 peuvent moduler la capacité de biotransformation, influençant la susceptibilité au stress chimique et façonnant des phénotypes cellulaires dépendants de l’exposition. FMO1 est également pertinente pour les études mécanistiques des perturbations métaboliques, de la gestion des sous‑produits oxydatifs et des différences interindividuelles de réponse aux xénobiotiques.
FMO1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FMO1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FMO1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FMO1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FMO1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.