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Flt-4慢病毒激活颗粒(h) | sc-400684-LAC | 200 µl | $455.00 |
FLT4 编码 Flt-4(VEGFR-3),这是一种受体酪氨酸激酶,主要在淋巴内皮细胞中表达,负责转导 VEGF-C 和 VEGF-D 信号,从而调控淋巴管生成、血管通透性以及内皮细胞迁移。配体结合后,Flt-4 会激活经典的 PI3K–AKT、MAPK/ERK 和 PLCγ 信号级联通路,在血管发育与组织重塑过程中协调细胞增殖与生存相关程序。FLT4 信号失调与淋巴管畸形及肿瘤相关淋巴管生成异常有关,并常在转移生物学和炎症微环境研究中受到关注。作为连接生长因子信号与内皮细胞命运决定的通路节点,FLT4 被广泛用作血管与淋巴系统研究中的标志物和功能决定因素。
Flt-4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FLT4 表达。
Flt-4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FLT4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Flt-4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FLT4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。