Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EphB3 Antibody (A-12): sc-514139. Western blot analysis of EphB3 expression in COLO 205 (A), T-47D (B), F9 (C) and Sol8 (D) whole cell lysates.
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EphB3双切口酶质粒(h): sc-403039-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EphB3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EphB3双切酶质粒（h）和EphB3双切酶质粒（h2）编码针对EPHB3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EphB3: sc-514139，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EphB3双切口酶质粒(h) | sc-403039-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphB3双切口酶质粒(h2) | sc-403039-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHB3 编码 EphB3 受体酪氨酸激酶，属于 ephrin 受体家族成员；该受体与膜锚定的 ephrin‑B 配体结合后，介导依赖细胞接触的信号传导。EphB3 通过与 Rho 家族 GTP 酶、MAPK/ERK 信号以及 PI3K 相关网络交叉的通路，调控细胞间通讯、细胞骨架重塑、黏附与定向迁移。在发育与组织稳态过程中，EphB3 参与边界形成、轴突导向和上皮组织化；其失调与多种癌症背景下侵袭与分化程序的改变相关。这些特性使 EPHB3 成为在模型系统中解析受体驱动的信号输出与细胞行为的有用靶点。
EphB3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EPHB3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EPHB3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EPHB3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EPHB3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。