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Emx2慢病毒激活颗粒(m) | sc-420170-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Emx2 编码一种同源盒转录因子,在胚胎发育过程中建立区域身份方面发挥关键作用,尤其参与前脑、大脑皮层以及感觉器官的模式形成。EMX2 作用于调控基因表达的网络,协调祖细胞增殖、神经元分化与组织形态发生,并与 Wnt/β-连环蛋白、FGF 和 BMP 等发育信号通路相互整合。在神经系统中,Emx2 通过调控塑造细胞命运与连接方式的转录程序,影响皮层分区(arealization)与层状结构组织。EMX2 的表达或活性失调与神经发育异常及分化状态改变有关,因此它是小鼠模型中研究发育期基因调控与谱系决定的一个重要节点。
Emx2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Emx2 表达。
Emx2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Emx2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Emx2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Emx2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。