EMP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407036-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EMP-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EMP-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EMP-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EMP3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EMP-3 Anticorpo (SW-5): sc-81797
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EMP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407036-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EMP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407036-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EMP3 codifica a proteína de membrana epitelial 3 (EMP-3), uma glicoproteína de membrana do tipo tetraspan implicada na regulação das interações célula–célula, na organização da membrana e na sinalização na membrana plasmática. Em células humanas, a EMP-3 tem sido associada à modulação de vias acionadas por receptores, incluindo as vias de sinalização EGFR/PI3K–AKT e MAPK, influenciando a proliferação, a sobrevivência e comportamentos migratórios. Alterações de expressão e alterações genômicas de EMP3 foram relatadas em múltiplos tipos de tumores e em contextos neurológicos, relacionando-a a processos como diferenciação, invasão e respostas ao microambiente. Como fator associado à superfície celular, a EMP-3 é frequentemente estudada pelo seu impacto na dinâmica de sinalização, no tráfego intracelular e em programas transcricionais a jusante relevantes para a biologia de doenças.
EMP-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EMP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EMP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EMP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EMP3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.