EMILIN-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406521

Übersicht

EMILIN2 kodiert EMILIN-2, ein Glykoprotein der extrazellulären Matrix, das in elastikfaserassoziierten Mikrofibrillen angereichert ist und zur Organisation der Matrix sowie zur Zell–Matrix-Signalübertragung beiträgt. EMILIN-2 steht in Wechselwirkung mit der integrinvermittelten Adhäsion und der Mechanotransduktion und beeinflusst dadurch die Zytoskelettdynamik, Zellmigration und Gewebeumbauprozesse. Über diese extrazellulären Signale kann EMILIN2 Signalwege modulieren, die mit Entzündung sowie der vaskulären und stromalen Homöostase verknüpft sind, einschließlich von Prozessen, die angiogene und fibrotische Reaktionen mitprägen. Eine dysregulierte EMILIN2-Expression und eine veränderte Matrixarchitektur wurden mit dem Umbau der Tumormikroumgebung und kardiovaskulär bedingten Defekten der extrazellulären Matrix in Verbindung gebracht, was die Relevanz des Gens für die Erforschung von Krankheitsmechanismen unterstreicht.

Das EMILIN-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des EMILIN2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des EMILIN2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von EMILIN2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die EMILIN-2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von EMILIN2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der EMILIN-2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf EMILIN2-Exone abzielen, die für die EMILIN-2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere EMILIN2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom EMILIN-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom EMILIN-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des EMILIN2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das EMILIN-2 HDR-Plasmid (h) und EMILIN-2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von EMILIN2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten EMILIN2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.