Plasmide Double Nickase (m) DMRT2: sc-432587-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) DMRT2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DMRT2 Double Nickase (m) et le plasmide DMRT2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Dmrt2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) DMRT2 | sc-432587-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) DMRT2 | sc-432587-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dmrt2 code DMRT2, un facteur de transcription à domaine DM qui régule des programmes de mise en place embryonnaire, notamment la somitogenèse et le développement du squelette axial, en coordonnant des réseaux transcriptionnels spécifiques de lignée. Chez la souris, DMRT2 contribue à la polarité des somites et aux signaux d’asymétrie gauche–droite qui façonnent l’organisation musculosquelettique au cours du développement précoce. Son activité s’inscrit à l’interface de voies de signalisation du développement qui gouvernent la différenciation du mésoderme et la temporalité morphogénétique, ce qui en fait un nœud d’intérêt pour étudier le contrôle transcriptionnel de la spécification tissulaire. Une dérégulation de la fonction de Dmrt2 a été associée à des anomalies congénitales du développement dans des systèmes modèles, ce qui souligne sa pertinence pour des études mécanistiques des circuits de régulation génique à l’origine de la morphogenèse.
DMRT2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Dmrt2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Dmrt2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Dmrt2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Dmrt2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.