Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO D2DR/Dopamine D2 Receptor (m): sc-420053
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- D2DR/Dopamine D2 Receptor Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique D2DR/Dopamine D2 Receptor, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: D2DR/Dopamine D2 Receptor Antibody (B-10): sc-5303
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO D2DR/Dopamine D2 Receptor (m) | sc-420053 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Drd2 code le récepteur dopaminergique D2 (D2DR), un RCPG couplé à Gi/o qui module l’excitabilité neuronale et la transmission synaptique en inhibant l’adénylate cyclase, en réduisant la signalisation cAMP/PKA et en régulant l’activité des canaux ioniques. Le D2DR influence également les voies MAPK/ERK et PI3K, et agit comme autorécepteur en contrôlant la libération et la synthèse de dopamine dans les circuits dopaminergiques. Dans le cerveau de la souris, Drd2 contribue à la signalisation striatale et corticolimbique impliquée dans la motivation, l’apprentissage par la récompense et le contrôle moteur. Une signalisation D2DR dérégulée a été impliquée dans la biologie de troubles neuropsychiatriques et de troubles du mouvement, ce qui fait de Drd2 une cible largement utilisée pour des études mécanistiques des circuits dopaminergiques et de la signalisation médiée par les récepteurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO D2DR/Dopamine D2 Receptor (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Drd2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Drd2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Drd2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine D2DR/Dopamine D2 Receptor.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Drd2 pour l'étude de la signalisation de D2DR/Dopamine D2 Receptor, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Drd2 essentiels à la fonction de D2DR/Dopamine D2 Receptor
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Drd2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le D2DR/Dopamine D2 Receptor plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le D2DR/Dopamine D2 Receptor plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Drd2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le D2DR/Dopamine D2 Receptor plasmide HDR (m) et le D2DR/Dopamine D2 Receptor (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Drd2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Drd2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.