CYP51A1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419931

개요

마우스 Cyp51 유전자는 사이토크롬 P450 효소인 CYP51A1(라노스테롤 14α-탈메틸화효소)을 암호화하며, 이는 콜레스테롤 및 기타 스테롤로 이어지는 스쿠알렌 이후 단계의 메발론산/스테롤 생합성 경로에서 핵심 반응을 촉매하는 보존된 모노옥시게나아제입니다. CYP51A1은 스테롤 중간체의 흐름(플럭스)을 조절함으로써 세포막 조성, 지질 뗏목(리피드 래프트) 의존적 신호전달, 그리고 세포 항상성을 조절하는 스테롤 유래 대사산물의 가용성에 영향을 미칩니다. 스테롤 생합성의 교란은 증식, 분화, 스트레스 반응의 변화와 연관되어 있어 Cyp51은 대사 재배선 및 기관(조직) 특이적 지질 요구를 연구하는 데 유용한 핵심 지점으로 여겨집니다. 마우스 모델에서 Cyp51을 조작하면 콜레스테롤 경로 조절 기전과 그것이 발달 및 대사 표현형에 기여하는 바를 기계적으로 규명하는 데 도움이 됩니다.

CYP51A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cyp51 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cyp51 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cyp51의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CYP51A1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CYP51A1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cyp51 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CYP51A1 기능에 중요한 Cyp51 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cyp51 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CYP51A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CYP51A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cyp51 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CYP51A1 HDR 플라스미드 (m) 및 CYP51A1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cyp51 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cyp51 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.