Plasmide Double Nickase (m) CYP4A10: sc-419927-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CYP4A10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP4A10 Double Nickase (m) et le plasmide CYP4A10 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cyp4a10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CYP4A10 | sc-419927-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CYP4A10 | sc-419927-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cyp4a10 code l’enzyme murine du cytochrome P450 CYP4A10, une monooxygénase associée au réticulum endoplasmique qui catalyse l’ω‑hydroxylation des acides gras à chaîne moyenne et de l’acide arachidonique afin de générer des eicosanoïdes bioactifs tels que le 20‑HETE. Par ces réactions, CYP4A10 influence l’homéostasie lipidique, les programmes métaboliques régulés par PPARα, ainsi que le métabolisme oxydatif rénal et hépatique. Des altérations de l’activité de Cyp4a10 ont été reliées à des voies modulant le tonus vasculaire, la gestion du sodium et la signalisation inflammatoire, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de phénotypes cardiométaboliques et rénaux. Des modèles in vivo et des modèles cellulaires exploitent la perturbation de Cyp4a10 pour analyser comment l’oxydation des acides gras et la production d’eicosanoïdes façonnent la physiologie des tissus et les réponses au stress.
CYP4A10 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cyp4a10 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cyp4a10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cyp4a10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cyp4a10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.