Plasmide Double Nickase (h) CYP2C9: sc-403593-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CYP2C9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP2C9 Double Nickase (h) et le plasmide CYP2C9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYP2C9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CYP2C9 | sc-403593-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CYP2C9 | sc-403593-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2C9 code une monooxygénase de type cytochrome P450 hème‑thiolate qui catalyse, dans le réticulum endoplasmique, la biotransformation oxydative d’une grande diversité de xénobiotiques et de substrats endogènes. Dans le cadre du métabolisme de phase I, CYP2C9 contribue au transfert d’électrons dépendant de l’état rédox via la NADPH–cytochrome P450 réductase, modulant ainsi l’exposition cellulaire à des intermédiaires réactifs et les voies de conjugaison en aval. Les polymorphismes génétiques et les modifications de l’expression hépatique de CYP2C9 sont associés à une variabilité interindividuelle de la clairance des médicaments et à la susceptibilité aux effets indésirables médicamenteux, ce qui en fait un locus clé en pharmacogénomique. Une activité dysrégulée de CYP2C9 est également étudiée dans le contexte des mécanismes de lésion hépatique et du remodelage des réseaux de détoxification à l’échelle des voies.
CYP2C9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP2C9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP2C9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP2C9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP2C9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.