Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
CCNB1/cyclin B1 Plasmides CRISPR (h)
- Espèce cible : human ; pour le produit mouse correspondant, voir CCNB1/cyclin B1 CRISPR Plasmids (m).
- Les plasmides CRISPR/Cas9 KO sont constitués de séquences d'ARN guide de 20 nt spécifiques de CCNB1/cyclin B1 dérivées de la base de données GeCKO (v2)
- Pour le knockout de gène, les séquences d'ARN guide dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure double brin (DSB) dans l'ADN génomique
- Des plasmides CRISPR spécifiques pour le knockout et l'activation sont disponibles. Veuillez vous référer aux informations détailllées ici below
- Le knockout ou l'activation d'un gène peuvent être évalués en utilisant CCNB1/cyclin B1 Antibody (GNS1): sc-245
- Tous les produits sont fournis en plasmides ADN purifiés et sont prêts à l'emploi, à l'exception des particules lentivirales d'activation qui sont préempaquetées en particules lentivirales pour une utilisation avec des cellules difficiles à transfecter.
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CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
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Les Plasmides KO CRISPR/Cas9, Plasmides Double Nickase et Plasmides d'Activation CRISPR/dCas9 sont considérés comme des "Produits sous Licence" et doivent être utilisés conformément à la Licence/Etiquette limitée. Pour en savoir plus, Cliquez ici
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Les Plasmides CRISPR/Cas9 Knockout (KO) CCNB1/cyclin B1 (h2) consistent en un mélange de trois plasmides chacun codant la nucléase Cas9 et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique de CCNB1/cyclin B1, élaboré pour une extinction (knockout) optimale.
- Les séquences D'ARN guide (gARN) sont issues de la bibliothèque GeCKO (v2) et dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure du double brin (DSB) d'ADN génomique au niveau d'un site spécifique (%link_11%)
- Pour sélectionner les cellules ayant intégré un site de rupture de l'ADN induit par la Cas9, il est recommandé de co-transfecter avec le Plasmide HDR CCNB1/cyclin B1 HDR Plasmid (h2) (sc-400114-HDR-2)
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CCNB1/cyclin B1 Antibody (GNS1): sc-245
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- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plamide HDR CCNB1/cyclin B1 (h2) est recommandé pour la co-transfection avec le Plasmide CRISPR/Cas9 KO CCNB1/cyclin B1 (h2)
- Le Plasmide HDR CCNB1/cyclin B1 (h2) correspond à un mélange de 2 à 3 plasmides, chacun contenant une matrice de réparation homologue dirigée de l'ADN (HDR) correspondant aux sites de coupure générés par le Plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant CCNB1/cyclin B1 (h2)
- Chaque matrice HDR correspond à deux bras homologues de 800 pb élaborés pour se lier spécifiquement à l'ADN génomique englobant le site de coupure de l'ADN double brin induit par Cas9
- Chaque Plasmide HDR intègre un gène de résistance à la puromycine afin de sélectionner les cellules dont le gène cible a été inactivé (KO) de façon stable et un gène RFP (Protéine Fluorescente Rouge) pour vérifier visuellement la transfection
- Les gènes de résistance à la puromycine et à la RFP sont encadrés de deux sites LoxP qui permettront d'être traités ulterieurement par le Cre Vector sc-418923
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- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CCNB1/cyclin B1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Les paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h2) CCNB1/cyclin B1 diffèrent des paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h) CCNB1/cyclin B1
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CCNB1/cyclin B1 Antibody (GNS1): sc-245
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Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide CRISPR d'Activation (h) CCNB1/cyclin B1 correspond à un système d'activation de la transcription par un médiateur d'activation synergique du système (SAM) spécifiquement conçu pour réguler positivement l'expression du gène
- CCNB1/cyclin B1 Plasmide d'Activation CRISPR (h) est composé de trois plasmides au ratio 1:1:1 : un plasmide codant pour la nucléase Cas9 désactivée (dCas9) (D10A and N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64, et un gène de résistance à la blasticidine; un plasmide codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 et un gène de résistance à l'hygromycine; un plasmide codant pour un ARN guide spécifique de 20 nt fusionné avec deux aptamères ARN MS2, et un gène de résistance à la puromycine.
- Le complexe SAM résultant se lie à une région spécifique d'un site de départ de la transcription du gène cible et fournit un recrutement accru des facteurs de transcription pour une activation hautement efficace du gène cible
- Après transfection, l'efficacité d'activation du gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps : CCNB1/cyclin B1 Antibody (GNS1): sc-245
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Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CCNB1/cyclin B1 (h2) | sc-400114-KO-2 | 20 µg | $397.00 | |||
Plasmid HDR CCNB1/cyclin B1 (h2) | sc-400114-HDR-2 | 20 µg | $445.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h) CCNB1/cyclin B1 | sc-400114-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CCNB1/cyclin B1 | sc-400114-NIC-2 | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide CRISPR d'Activation (h) CCNB1/cyclin B1 | sc-400114-ACT | 20 µg | $397.00 |