Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CRM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400348-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CRM1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CRM1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CRM1 Anticorpo (C-1): sc-74454
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CRM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400348-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
XPO1 codifica o recetor de exportação nuclear CRM1, uma proteína da família das carioferinas-β que reconhece sinais de exportação nuclear ricos em leucina e medeia o transporte, dependente de RanGTP, de proteínas e de determinados RNAs do núcleo para o citoplasma. Ao controlar o tráfego nucleocitoplasmático, a CRM1 regula a progressão do ciclo celular, as respostas ao stress e programas de transcrição através da localização de cargas como supressores tumorais, fatores de transcrição e complexos ribonucleoproteicos. A função da CRM1 integra-se com o ciclo da GTPase Ran e com a dinâmica do complexo do poro nuclear para manter a sinalização compartimentalizada e a proteostase. A atividade desregulada de XPO1/CRM1 e a distribuição alterada de cargas são frequentemente estudadas na biologia do cancro, nas respostas antivirais e em mecanismos neurodegenerativos em que o transporte núcleo–citoplasma está perturbado.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CRM1 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene XPO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do XPO1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do XPO1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CRM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de XPO1 para a investigação da sinalização de CRM1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) XPO1 críticos para a função CRM1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos XPO1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CRM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CRM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus XPO1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CRM1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CRM1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia XPO1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo XPO1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.