Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) CREST: sc-403134-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CREST correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CREST Double Nickase (h) et le plasmide CREST Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SS18L1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CREST Antibody (D-7): sc-515827
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CREST | sc-403134-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CREST | sc-403134-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SS18L1 code CREST, un régulateur transcriptionnel enrichi dans les neurones qui couple le remodelage de la chromatine à l’expression génique dépendante de l’activité. CREST interagit avec le complexe BAF (SWI/SNF) et des corépresseurs tels que BRG1 et des HDAC pour moduler les programmes de différenciation neuronale, la morphogenèse dendritique et la plasticité synaptique. Par ces mécanismes épigénétiques et transcriptionnels, CREST influence la maturation des ARN et des voies de réponse au stress qui façonnent l’homéostasie neuronale. La dérégulation des réseaux associés à CREST a été liée à des phénotypes neurodégénératifs et à une connectivité neuronale altérée, faisant de SS18L1 un locus utile pour des études mécanistiques dans des modèles du système nerveux.
CREST Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SS18L1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SS18L1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SS18L1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SS18L1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.