claudin-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400609

개요

CLDN1은 클라우딘-1(claudin-1)을 암호화하며, 이는 타이트 정션 가닥(tight junction strand)의 필수 막 단백질 구성 요소로서 상피 장벽의 무결성, 세포 사이(세포간) 투과성(paracellular permeability), 그리고 정단-기저(apico-basal) 극성을 조절합니다. 클라우딘-1은 ZO-1과 같은 스캐폴드 단백질과의 상호작용을 통해 접합부의 조직화와 신호전달에 관여하며, 세포골격 역학과 Wnt/β-카테닌 및 EMT 관련 프로그램을 포함한 상피 항상성 연관 경로에 영향을 줍니다. CLDN1의 발현 또는 위치(localization)가 변화하면 장벽 기능 장애 및 염증 과정과 연관되며, 다양한 암종에서 상피의 형질전환, 침윤, 전이 맥락에서 자주 연구됩니다. 접합부를 규정하는 결정 인자로서 클라우딘-1은 접착 의존적 신호전달과 조직 구조를 규명하기 위한 마커이자 기전적 핵심 지점으로 널리 활용됩니다.

claudin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CLDN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CLDN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CLDN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 claudin-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 claudin-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CLDN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• claudin-1 기능에 중요한 CLDN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CLDN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• claudin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 claudin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CLDN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  claudin-1 HDR 플라스미드 (h) 및 claudin-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CLDN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CLDN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.