Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ChM-1 (h): sc-403523
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ChM-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ChM-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ChM-1 Antibody (H-10): sc-365693
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ChM-1 (h) | sc-403523 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CNMD code pour la chondromoduline‑1 (ChM‑1), une glycoprotéine sécrétée dérivée du cartilage, impliquée dans le maintien du microenvironnement avasculaire du cartilage en modulant le comportement des cellules endothéliales et l’homéostasie de la matrice extracellulaire. La ChM‑1 est associée à des programmes de différenciation chondrogénique et à des processus de remodelage tissulaire qui coordonnent le dépôt de matrice, l’adhésion cellulaire et la signalisation locale des facteurs de croissance dans les tissus musculo‑squelettiques. Une expression altérée de CNMD a été rapportée dans des contextes de dégénérescence et de réparation du cartilage, ce qui en fait un point d’entrée moléculaire pertinent pour l’étude de la biologie ostéo‑articulaire. De plus, l’activité de CNMD/ChM‑1 est pertinente pour l’étude de la suppression de l’angiogenèse et de la signalisation régulée par la matrice au cours du développement et du remodelage tissulaire associé aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ChM-1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CNMD dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CNMD, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CNMD à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ChM-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CNMD pour l'étude de la signalisation de ChM-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CNMD essentiels à la fonction de ChM-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CNMD pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ChM-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ChM-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CNMD. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ChM-1 plasmide HDR (h) et le ChM-1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CNMD pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CNMD définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.