Plásmido Doble Nickase (h) CHD7: sc-404017-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CHD7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CHD7 (h) y el plásmido de doble nickasa CHD7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CHD7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CHD7 Anticuerpo (F-11): sc-390742
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CHD7 | sc-404017-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CHD7 | sc-404017-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHD7 (proteína 7 de unión al ADN con helicasa de cromodominio) es un remodelador de cromatina dependiente de ATP que reconoce marcas de histonas mediante cromodominios y regula el posicionamiento de los nucleosomas para controlar programas de expresión génica durante el desarrollo. Participa en la regulación transcripcional y en la actividad de potenciadores (enhancers), interactuando con vías epigenéticas que coordinan la especificación de la cresta neural, la organogénesis y las decisiones de destino celular. La alteración de CHD7 se asocia con trastornos congénitos del desarrollo, en particular el síndrome CHARGE, y los cambios en la actividad de CHD7 se han estudiado también en el contexto de la biología tumoral y de los estados de diferenciación. Estas características hacen de CHD7 un objetivo útil para explorar la dinámica de la cromatina, el compromiso de linaje y las redes transcripcionales asociadas a enfermedad en células humanas.
CHD7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CHD7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CHD7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CHD7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CHD7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.