Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cdk9 Plasmide Double Nickase (h): sc-400242-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Cdk9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Cdk9 Double Nickase Plasmid (h) e il Cdk9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDK9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cdk9 Antibody (D-7): sc-13130
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Cdk9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdk9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK9 codifica la subunità catalitica del fattore positivo di allungamento della trascrizione b (P-TEFb), un complesso chinasi che fosforila il dominio C-terminale dell'RNA polimerasi II e i fattori di pausa per favorire un allungamento trascrizionale produttivo. Attraverso il controllo del rilascio della pausa in prossimità del promotore, Cdk9 regola programmi genici a risposta rapida, la progressione del ciclo cellulare e la trascrizione adattativa allo stress, integrandosi con la segnalazione dipendente dalla ciclina T e con reti regolatorie associate alla cromatina. Un'attività o una dipendenza da CDK9 deregolate sono state collegate a un'omeostasi trascrizionale alterata nel cancro e a perturbazioni dei circuiti trascrizionali infiammatori e virali, rendendolo un nodo centrale per lo studio dei meccanismi di controllo della trascrizione.
Cdk9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDK9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDK9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDK9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDK9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.