CDK2AP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406842

Übersicht

CDK2AP2 (CDK2-assoziiertes Protein 2) ist ein mit dem Zellzyklus verknüpfter Regulator, der an der Kontrolle der CDK2-Aktivität beteiligt ist und den G1/S-Übergang mit Programmen der DNA-Replikation koordiniert. Das Protein ist mit nukleären Prozessen assoziiert, die Proliferation, Chromatindynamik und die Aufrechterhaltung der Genomintegrität beeinflussen, was es für Studien zu replikativem Stress und Checkpoint-Kontrolle relevant macht. Eine veränderte Regulation CDK2AP2-abhängiger Signalwege wurde im Kontext fehlregulierten Zellwachstums und transformationsassoziierter Phänotypen untersucht, was seinen Einsatz als molekulares Werkzeug zur Analyse der Zellzyklus-Schaltkreise unterstützt. In menschlichen Zellmodellen kann eine Störung von CDK2AP2 dazu beitragen zu definieren, wie CDK2-zentrierte Netzwerke mit transkriptionellen Modulen und der DNA-Schadensantwort zusammenwirken.

Das CDK2AP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CDK2AP2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CDK2AP2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CDK2AP2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CDK2AP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CDK2AP2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CDK2AP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CDK2AP2-Exone abzielen, die für die CDK2AP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CDK2AP2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CDK2AP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CDK2AP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CDK2AP2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CDK2AP2 HDR-Plasmid (h) und CDK2AP2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CDK2AP2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CDK2AP2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.