Plasmide CRISPR/Cas9 KO CDK2AP2 (h): sc-406842

Présentation

CDK2AP2 (protéine 2 associée à CDK2) est un régulateur lié au cycle cellulaire, impliqué dans le contrôle de l’activité de CDK2 et la coordination de la transition G1/S avec les programmes de réplication de l’ADN. La protéine est associée à des processus nucléaires qui influencent la prolifération, la dynamique de la chromatine et le maintien de l’intégrité du génome, ce qui la rend pertinente pour l’étude du stress réplicatif et du contrôle des points de contrôle (checkpoints). Une régulation altérée des voies dépendantes de CDK2AP2 a été examinée dans le contexte d’une croissance cellulaire dérégulée et de phénotypes associés à la transformation, ce qui soutient son utilisation comme levier moléculaire pour analyser les circuits du cycle cellulaire. Dans des modèles de cellules humaines, la perturbation de CDK2AP2 peut aider à définir comment les réseaux centrés sur CDK2 s’articulent avec les modules transcriptionnels et de réponse aux dommages de l’ADN.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CDK2AP2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDK2AP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDK2AP2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDK2AP2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CDK2AP2.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDK2AP2 pour l'étude de la signalisation de CDK2AP2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de CDK2AP2 essentiels à la fonction de CDK2AP2
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDK2AP2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le CDK2AP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CDK2AP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDK2AP2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le CDK2AP2 plasmide HDR (h) et le CDK2AP2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDK2AP2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDK2AP2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.