Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) Cdk2: sc-419600-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Cdk2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cdk2 Double Nickase (m) et le plasmide Cdk2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cdk2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdk2 Antibody (D-12): sc-6248
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Cdk2 | sc-419600-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Cdk2** code la kinase dépendante des cyclines 2 (cyclin-dependent kinase 2), une kinase sérine/thréonine qui s’associe principalement aux cyclines E et A pour déclencher la transition G1/S et coordonner la progression de la phase S. CDK2 intègre les signaux mitogènes avec l’octroi de la licence de réplication de l’ADN, la dynamique des centrosomes et le contrôle des points de contrôle, en interagissant notamment avec la régulation RB–E2F et les voies de réponse aux dommages de l’ADN. Une activité altérée de CDK2 est fréquemment associée à une prolifération aberrante, à un stress de réplication et à une instabilité du génome, des phénotypes pertinents pour la biologie du cancer et certains défauts du développement. En tant que nœud central des circuits du cycle cellulaire, **Cdk2** est largement étudié dans des modèles de signalisation oncogénique, de différenciation et d’arrêt du cycle cellulaire induit par le stress.
Cdk2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cdk2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cdk2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cdk2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cdk2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.