CDIP Plasmide Double Nickase (h): sc-409425-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CDIP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CDIP Double Nickase Plasmid (h) e il CDIP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDIP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CDIP Plasmide Double Nickase (h) | sc-409425-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDIP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409425-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDIP1 codifica CDIP, una proteina responsiva allo stress identificata originariamente come bersaglio di p53, che contribuisce alla segnalazione apoptotica e alle decisioni sul destino cellulare in condizioni di stress genotossico e ossidativo. CDIP è stata collegata alle vie mitocondriali dell’apoptosi e alla modulazione delle risposte al danno del DNA, intersecandosi con i programmi trascrizionali regolati da p53 e con la successiva attivazione delle caspasi. Alterazioni dell’attività di CDIP1/CDIP sono state associate a una deregolazione dei segnali di sopravvivenza in contesti legati al cancro, inclusi effetti sulla sensibilità delle cellule tumorali allo stress e ai danni associati alla chemioterapia. Queste caratteristiche rendono CDIP1 un nodo utile per studiare i meccanismi dell’apoptosi, l’adattamento allo stress e il rimodellamento delle vie di p53 nelle cellule umane.
CDIP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDIP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDIP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDIP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDIP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.