Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD96 (h): sc-407300
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD96 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD96, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD96 Antibody (NK92.50.1): sc-53574
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD96 (h) | sc-407300 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CD96 est un récepteur transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines, exprimé principalement par les lymphocytes T et les cellules NK, où il module la formation de la synapse immunologique et la fonction effectrice cytotoxique. Il participe à l’adhésion et à une signalisation co‑inhibitrice via des interactions au sein du réseau des nectines et des protéines de type nectine, influençant des voies de signalisation qui ajustent les seuils d’activation et la production de cytokines. La fonction de CD96 s’inscrit dans la régulation des points de contrôle immunitaires, aux côtés de récepteurs tels que TIGIT et CD226, et façonne les réponses aux cellules stressées ou transformées dans le microenvironnement tumoral. Une activité et une expression dérégulées de CD96 ont été associées à une altération de l’immunité antitumorale, à l’inflammation chronique et à des mécanismes d’échappement immunitaire pertinents pour la recherche en oncologie et en immunologie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD96 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CD96 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CD96, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CD96 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD96.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CD96 pour l'étude de la signalisation de CD96, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CD96 essentiels à la fonction de CD96
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CD96 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD96 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CD96 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CD96. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD96 plasmide HDR (h) et le CD96 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CD96 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CD96 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.