CD84 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-416482

Panoramica

CD84 è un recettore della superfamiglia delle immunoglobuline appartenente alla famiglia SLAM, espresso prevalentemente sulle cellule immunitarie, dove partecipa all’adesione omofilica e alla segnalazione co-stimolatoria che modella l’attivazione dei linfociti e la comunicazione intercellulare. Attraverso associazioni con proteine adattatrici come SH2D1A/SAP e con chinasi a valle, CD84 influenza eventi di segnalazione legati alla formazione della sinapsi immunologica, alle risposte citochiniche e alla regolazione delle interazioni tra cellule B e cellule T. Alterazioni dell’espressione o della segnalazione di CD84 sono state riportate in contesti di disregolazione immunitaria, inclusi stati infiammatori e fenotipi immunitari associati a neoplasie ematologiche. In quanto nodo immunoregolatorio di superficie, CD84 è spesso studiato nei percorsi che governano l’attivazione e la differenziazione dei leucociti e la segnalazione dipendente dal contatto cellula–cellula.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD84 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CD84 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CD84 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CD84 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD84.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CD84 per lo studio della segnalazione di CD84, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CD84 critici per la funzione di CD84
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CD84 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD84 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CD84 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CD84. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD84 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CD84 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CD84 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CD84 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.