Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) CD81: sc-400185-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD81 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD81 Double Nickase (h) et le plasmide CD81 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD81. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD81 Antibody (B-11): sc-166029
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD81 | sc-400185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD81 | sc-400185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD81 est une tétraspanine humaine (TAPA-1) qui organise des microdomaines enrichis en tétraspanines à la membrane plasmique et coordonne le regroupement des récepteurs, l'adhésion et la transduction du signal. Par ses interactions avec des partenaires tels que CD19/CD21 dans les cellules B et des intégrines, notamment ITGA4/ITGB1, CD81 module l'activation et la migration des cellules immunitaires ainsi que les processus de trafic membranaire. Elle participe également à la biologie des vésicules et à la composition des exosomes, influençant la communication intercellulaire et la présentation d'antigènes. Des réseaux associés à CD81 dérégulés ont été liés à des dysfonctionnements immunitaires et à une susceptibilité modifiée à l'entrée des agents pathogènes, ce qui fait de CD81 une cible utile pour étudier l'organisation membranaire et les interactions hôte–pathogène.
CD81 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD81 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD81. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD81. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD81.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.