Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD7 (h): sc-407287

Présentation

CD7 code un récepteur transmembranaire de la superfamille des immunoglobulines, exprimé principalement sur les thymocytes et les lymphocytes T matures, où il participe à l’activation des lymphocytes T, à l’adhésion et à l’organisation de la synapse immunologique via des interactions qui modulent les seuils de signalisation. La signalisation associée à CD7 s’interface avec des voies impliquant les kinases de la famille SRC et des voies liées aux MAPK, qui façonnent la différenciation des lymphocytes T, les réponses cytokiniques et la fonction effectrice cytotoxique. Une expression altérée de CD7 est fréquemment utilisée comme caractéristique immunophénotypique en biologie des lignées lymphoïdes et est étudiée dans le contexte de modèles de malignités des lymphocytes T et de dérégulation immunitaire. En tant que marqueur de surface assorti de rôles fonctionnels de signalisation, CD7 constitue un nœud exploitable pour disséquer les réseaux de signalisation proximaux du récepteur des lymphocytes T et les programmes de lignée.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD7 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CD7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CD7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CD7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD7.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CD7 pour l'étude de la signalisation de CD7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de CD7 essentiels à la fonction de CD7
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CD7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le CD7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CD7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CD7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le CD7 plasmide HDR (h) et le CD7 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CD7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CD7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.