Plasmide Double Nickase (h) CD55: sc-400738-NIC

CD55 (facteur accélérateur de la décroissance, *decay-accelerating factor*) est une protéine régulatrice du complément ancrée à la membrane via un GPI, qui protège les cellules de l’hôte des dommages médiés par le complément en accélérant la dissociation des convertases C3/C5. En limitant la formation des complexes effecteurs en aval, CD55 contribue à façonner la surveillance immunitaire innée et influence la signalisation inflammatoire à la surface cellulaire et au sein du microenvironnement. Une expression ou une fonction altérée de CD55 est associée à une activation dérégulée du complément et a été étudiée dans des contextes incluant les troubles hémolytiques, l’auto-immunité et les mécanismes d’échappement tumoral au système immunitaire. *In vitro*, CD55 est couramment utilisé comme marqueur et nœud fonctionnel pour étudier la sensibilité au complément, le trafic des protéines membranaires et les interactions entre cellules immunitaires.

CD55 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD55 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD55. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD55. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD55.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.